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CPW为植物原生质体制备分离过程中常用的基础盐，也称CPW酶解缓冲液(不含酶)、CPW洗液或原生质体洗液。不同的CWP含有不同的渗透压稳定剂，也有不同的用途。不同的植物样品，最适甘露醇浓度不一，请根据需求选择或者定做。

• 植物原生质体的分离与纯化：
  
  • 将撕去表皮的植物叶片或花瓣置于酶液(pH6.9，去表皮面接触酶液)，在25℃黑暗条件下，酶解1～2小时。
    
  • 用350目网过滤除去未完全消化的叶片等残渣。
    
  • 在1000rpm条件下离心5分钟，弃上清液。红辣椒800转/分离心5分钟。加入3～4mL 13% CPW洗液，相同条件下离心，弃上清液。加1mL 13% CPW洗液悬浮。
    
  • 蔗糖漂浮法去除碎片。
    
    • 用细口吸管吸20%蔗糖溶液约3mL，小心插入盛有原生质体悬液的离心管底部，缓缓将蔗糖溶液挤出，由于比重不同，蔗糖溶液与原生质体悬液中间有一明显界面(注意要有明显界面).
      
    • 离心5分钟(1000转/分，辣椒800转/分)，此时死细胞及碎片降至蔗糖溶液内，聚集在离心管底部，而活细胞由于有大量泡沫，故漂浮在上下界面处，
      
    • 用细管吸取漂浮在上下界面处的健康原生质体，转入干净的离心管中，加入3～4mL13%CPW洗液离心(镜检决定是否需要离心)，离心5分钟(1000转/分，辣椒800转/分)，收集沉淀，最终原生质体体积控制在0.5ML左右。
• 细胞融合：
  
  • 不同的原生质体各300μL与带盖离心管中，另加入300μL 40% PEG液，30℃水浴中温浴15min；
    
  • 融合液一滴于载玻片上(注意保持一定湿度，不能太干)，轻轻盖上盖玻片，显微镜观察。
• 实验结果：
  用光学显微镜或倒置显微镜(高倍)观察2～3个细胞靠近或融合的过程。观察时注意不同程度的融合现象。通常分为五个阶段：
  
  • 两细胞膜接触，粘连；
    
  • 细胞膜形成穿孔；
    
  • 两细胞的细胞质连通；
    
  • 通道扩大，两细胞连成一体；
    
  • 细胞完全合并，形成一个含有两个或多个核的圆形细胞。